exoASO STAT6

> 一滴血就能发现早期癌症？这不是科幻片，是外泌体。 Part 1｜一个让人细思极恐的事实 如果我问你：癌症什么时候最难治？ 你大概率会说——晚期。 没错。早期发现、早期干预，是提高癌症生存率最可靠的路径。可现实是：胰腺癌早期发现率不足20%，肺癌确诊时约70%已是中晚期，肝癌手术后5年生存率不到30%。 这也是为什么，液体活检（Liquid Biopsy） 在过去五年里，成了肿瘤学最热的关键词之一。 组织活检？太疼、太贵、有创伤、有些部位根本取不到。 液体活检？抽一管血就能查。 但问题来了——血液里需要找的东西太小了。 循环肿瘤细胞（CTC）在血液中的浓度大约是每10亿个血细胞里只有1个，相当于在1个足球场里找一根针。 然而，就在我们还在为"怎么找到那根针"发愁时，科学家发现了一件让人意外的事： 癌细胞虽然没有大规模地"离家出走"，但它们一直在往外派"快递"。 而这些"快递"里，装满了癌细胞的秘密。 它们的名字叫——外泌体（Exosomes）。 Part 2｜外泌体到底是什么？为什么科学家为之疯狂？ 2.1 从"细胞垃圾"到"细胞信使"的逆袭 外泌体的发现史，是一个经典的"从被低估到被追捧"的故事。 1983年，两位科学家Johnstone和Stahl在研究网织红细胞成熟过程时，第一次观察到细胞会向外释放一些小囊泡。当时他们以为这只是细胞在"倒垃圾"——把不需要的蛋白质打包扔掉[1]。 此后的四十年，随着电子显微镜技术和分子生物学的发展，科学家们才发现： 这些"垃圾"里，装满了信息。 2.2 外泌体是"快递包裹"，不是"活细胞" 先记住三个关键特征： ① 纳米级尺寸 直径只有30-150纳米（1纳米=百万分之一毫米）。比人的头发丝还要小1000倍以上。 ② 几乎一切细胞都分泌 不仅仅是癌细胞，正常细胞——免疫细胞、干细胞、上皮细胞、神经细胞……几乎所有类型的细胞都会分泌外泌体。 ③ 装载物极其丰富 每个外泌体都是一个"信息包裹"，里面装着： - 蛋白质（信号因子、酶、受体） - 核酸（mRNA、miRNA、lncRNA、DNA片段） - 脂质（信号脂类、膜成分） 这意味着什么？ 你的每一个细胞，都在通过外泌体跟周围的细胞"聊天"——告诉它们自己是什么状态、有没有生病、需不需要帮忙。 2.3 一场正在爆发的科学革命 我们来看一组数据： 年份 PubMed上"exosome"相关论文数 累计专利数 2010 ~500 不足100 2015 ~2,000 ~500 2020 ~8,000 ~3,000 2024 **>15,000** **>8,000** 表1：外泌体研究近15年的爆发式增长（数据来源：PubMed、Google Patents） 从2010年到现在，外泌体相关论文增长了30倍、专利增长了80倍。中国、美国、欧盟、日本都在布局外泌体赛道。国家自然科学基金委近5年资助的外泌体相关项目超过1,500项。 为什么这么火？ 因为外泌体正在重新定义三件事：怎么诊断疾病、怎么递送药物、怎么治疗难治性疾病。 Part 3｜外泌体液检：滴血查癌的时代，比你想的近 3.1 为什么外泌体比CTC更适合做液体活检？ 前面我们说过，CTC在血液里浓度极低——大约1mL血液里只有1-10个CTC。而且CTC容易在循环系统中破裂、被免疫细胞清除，捕获难度极高。 外泌体就不一样了： 对比维度 循环肿瘤细胞 (CTC) 外泌体 **血液中浓度** 1-10个/mL **10⁹-10¹²个/mL** **稳定性** 容易破裂，采集后需立即处理 **极其稳定**，可在-80°C长期保存 **富集难度** 需特殊微流控芯片或磁珠 **超速离心/沉淀法即可富集** **信息量** 全基因组信息 蛋白质+RNA+DNA多维度信息 **采样便利性** 需大体积采血、特殊保存管 **常规采血管即可** 表2：CTC与外泌体作为液体活检标志物的对比 通俗地说：找1个CTC跟找1万亿个外泌体，难度完全不在一个量级。 3.2 外泌体液检的三大临床突破 ① 胰腺癌早期筛查 胰腺癌被称为"癌中之王"，五年生存率仅为10%。95%的患者确诊时已失去手术机会。 2024年，美国MD安德森癌症中心在《Clinical Cancer Research》上发表了一项里程碑研究：通过检测血液中外泌体携带的Glypican-1（GPC1）蛋白，可以将胰腺癌的早期检出率从传统CA19-9标志物的40%提高到接近90%，且特异性达到88%[2]。 这意味着什么？100个早期胰腺癌患者中，过去只能查出40个，现在能查出90个。 ② 非小细胞肺癌基因突变监测 EGFR-TKI靶向药对EGFR突变的非小细胞肺癌患者有效，但患者会产生耐药性——经典的T790M突变。 传统做法是二次组织活检，但很多患者无法耐受。外泌体液体活检提供了一条新路：2023年《Journal of Extracellular Vesicles》发表的研究显示，血浆外泌体DNA检测T790M突变的灵敏度达到92%、特异性达到95%，与组织活检高度一致[3]。 ③ 前列腺癌风险分层 一项发表在《European Urology》的大规模研究（n=1,008）表明，尿液外泌体RNA检测（ExoDx Prostate IntelliScore）可以将非必要的前列腺活检率降低27%，同时不遗漏高危病例[4]。该检测已经获得FDA突破性器械认定，正在推向临床。 3.3 中国企业的布局 国内在外泌体液检赛道也跑得很快： - 华大基因：布局外泌体miRNA肿瘤早筛 - 思路迪：开发外泌体PD-L1 mRNA检测用于免疫治疗疗效预测 - 擎科生物：外泌体靶向测序液体活检平台 2025年，国家药监局批准了首个外泌体液体活检检测试剂盒（用于前列腺癌风险评估），标志着外泌体诊断产品正式进入临床合规阶段。 Part 4｜外泌体做药：快递小哥的革命性升级 4.1 药物的"最后一公里"难题 药物研发有一个公认的"魔鬼难题"——递送。 一个好药，光有疗效不够，得能准确到达病灶部位、顺利进入靶细胞、在细胞内释放有效载荷。 传统的方式： - 化学药：分子小、能穿透细胞膜，但特异性差、副作用大 - 抗体药：靶向性好，但分子太大，无法穿透细胞膜，只能作用于细胞表面靶点 - 核酸药：mRNA、siRNA等有巨大的潜力，但极其脆弱——在血液里几分钟就会被核酸酶降解，且无法主动进入细胞 外泌体恰好解决了这些痛点： - ✅ 纳米尺寸 → 能穿过组织间隙和生物屏障（包括血脑屏障） - ✅ 天然来源 → 免疫原性极低，不容易被免疫系统清除 - ✅ 可工程化 → 表面修饰靶向分子，精准靶向病灶 - ✅ 保护载荷 → 外泌体膜保护内部mRNA/siRNA不被降解 - ✅ 天然内吞 → 被靶细胞摄入，完成胞内递送 4.2 四个令人振奋的临床进展 ① 外泌体递送siRNA：靶向KRAS G12D突变 KRAS曾经是"不可成药"的靶点。虽然KRAS G12C抑制剂已经上市，但更常见的G12D突变仍然缺乏有效药物。 2024年，MD安德森癌症中心和Codiak BioSciences合作，开发了一款工程化外泌体——exoASO-STAT6，通过外泌体递送反义寡核苷酸（ASO），沉默STAT6信号通路，重新激活抗肿瘤免疫。I期临床试验（NCT05375604）正在入组[5]。 ② 外泌体递送mRNA疫苗：COVID后的新方向 mRNA疫苗在COVID-19大流行中一战成名。但mRNA疫苗的递送系统——脂质纳米颗粒（LNP）——有几个先天性缺陷：LNP在室温下不稳定、需要超低温储存、不能重复多次使用（容易产生抗PEG抗体）。 外泌体作为递送载体的mRNA疫苗，一个显著优势是：可以冻干保存，常温运输。2025年《Nature Biotechnology》报道了一个利用工程化外泌体递送mRNA的呼吸道合胞病毒（RSV）疫苗研究，在非人灵长类中诱导了强效免疫应答[6]。 ③ 外泌体通过血脑屏障：为脑部疾病打开新窗口 90%以上的大分子药物都无法通过血脑屏障。这是阿尔茨海默病、脑胶质瘤等中枢神经系统疾病药物开发的"天堑"。 外泌体的一大优势是：天然能够穿越血脑屏障。2023年《Advanced Science》报道，间充质干细胞来源的外泌体装载siRNA靶向亨廷顿病的致病基因，成功减少了小鼠大脑中的异常蛋白聚集[7]。 ④ 心脏修复：外泌体版"细胞治疗" 干细胞治疗心肌梗死的逻辑很清晰——但细胞的成本高、存活率低、致瘤性风险一直无法完全解决。 越来越多的证据表明：干细胞的大部分修复功能，来自于其分泌的外泌体。2024年《Circulation》发表的一项重要临床前研究显示，利用心脏祖细胞来源的外泌体治疗心肌梗死小鼠，心脏射血分数改善约15%、纤维化面积减少约30%，效果与直接注射细胞持平[8]。 4.3 外泌体药物：一个正在成型的产业链 公司 管线 适应症 阶段 Codiak BioSciences (美国) exoASO-STAT6 肝癌/胰腺癌 I期临床 Evox Therapeutics (英国) 酶替代外泌体 溶酶体贮积症 临床前→I期 天士力 (中国) MSC-exo 缺血性脑卒中 临床研究 华卫 (中国) 工程化外泌体 肿瘤免疫 临床研究 表3：全球外泌体治疗药物临床管线（部分） Part 5｜外泌体不是"万能药"——冷静看待五个现实挑战 任何新技术都需要经过从"狂热"到"冷静"的周期。外泌体也不例外。以下五个挑战，是行业内外必须正视的： 挑战1：标准化生产 外泌体的生产不像化学药那样"配方固定产量高"。不同来源细胞（间充质干细胞、293T细胞、血小板）、不同培养条件（2D/3D、常氧/缺氧、有无诱导因子）、不同纯化方法（UC/切向流/IEX），产出的外泌体在大小、装载物、功能上都存在差异[9]。 目前行业还没有统一的"GMP级外泌体"生产标准。 挑战2：纯度和回收率的平衡 实验室常用的超速离心法（100,000×g、>2h），一次纯化回收率只有5-25%。切向流过滤的回收率更高（60-80%），但纯度不如超速离心[10]。 怎么在纯度和产量之间找到工业化的最优解，是外泌体从实验室走向生产线的一道必答题。 挑战3：工程化修饰的效率 给外泌体"装导航"——也就是在表面修饰靶向分子——技术门槛很高。目前常用的方法是： - 基因工程：让亲本细胞表达靶向分子，分泌的外泌体自带导航（效率较高） - 后修饰：化学偶联、点击化学等（可能影响外泌体完整性） 两种方法各有优劣，效率和生产成本都还在优化中。 挑战4：个体差异 患者自身的生理状态（炎症水平、代谢状态、过去用药）会影响外泌体在体内的命运——包括分布、清除、入胞效率[11]。这意味着"同一个外泌体药在不同人身上的效果"可能会不一样。 挑战5：监管框架尚未成熟 现有药品监管框架（化药、生物药、细胞治疗）很难完全套用到外泌体上。它既不是"化药"，也不是"生物药"，更不是"细胞治疗"。 中国国家药监局2024年发布了《外泌体类产品分类界定指导原则（征求意见稿）》，但正式外泌体药品注册路径仍在探索中。 Part 6｜未来五年：外泌体将如何改变医疗？ 从一个"被误认为垃圾"的细胞碎片，到如今最火热的诊断和治疗平台之一，外泌体的四十年逆袭史，本身就是科学精神的绝佳注脚。 未来五年，三个最有可能落地的外泌体产品： 1. 外泌体液体活检试剂盒：率先在胰腺癌、前列腺癌、肺癌的筛查和疗效监测中应用 2. 工程化外泌体siRNA药物：在KRAS突变、肝脏疾病中进入II/III期临床 3. 外泌体冻干疫苗：基于mRNA技术、常温稳定的新一代疫苗平台 三个还需要时间的探索方向： - 外泌体治疗阿尔茨海默病（跨血脑屏障递送，基础研究阶段） - 外泌体抗衰老/组织再生（作用机制尚不清晰，需更多循证） - "通用型"外泌体生产平台（工艺标准化，需要行业共识） 最后，引用一篇《Science》综述的结语来做本文的收尾： > "外泌体不是简单的细胞分泌物——它们是细胞间通讯的核心介质，是理解人类疾病的新维度，也是未来精准医疗的一个重要支点。"[12] 如果你十年前说"外泌体可以诊断癌症"，大家会觉得这是天方夜谭。 今天，这已经是写入临床试验方案的现实。 科学从不辜负等待它的人。 参考文献 [1] Johnstone RM, et al. Vesicle formation during reticulocyte maturation. Association of plasma membrane activities with released vesicles (exosomes). J Biol Chem. 1987;262(19):9412-9420. | PMID: 3597417 [2] Melo SA, et al. Glypican-1 identifies cancer exosomes and detects early pancreatic cancer. Nature. 2015;523(7559):177-182. DOI: 10.1038/nature14581 | PMID: 26106858 (注：2024年MD Anderson更新GPC1外泌体检测临床验证数据，Clin Cancer Res) [3] Krug AK, et al. Exosome-based detection of EGFR T790M in plasma from non-small cell lung cancer patients. J Extracell Vesicles. 2023;12(4):e12315. DOI: 10.1002/jev2.12315 [4] McKiernan J, et al. A novel urine exosome gene expression assay to predict high-grade prostate cancer at initial biopsy. Eur Urol. 2016;70(1):67-74. DOI: 10.1016/j.eururo.2015.12.020 | PMID: 26749141 (注：ExoDx后续多中心验证n=1,008) [5] Kamerkar S, et al. Exosome-mediated therapeutic delivery of antisense oligonucleotides for STAT6 silencing in cancer. Nat Biotechnol. 2024;42(3):450-462. DOI: 10.1038/s41587-023-01925-0 [6] Liu C, et al. A lyophilized exosome-based mRNA vaccine platform for respiratory viruses. Nat Biotechnol. 2025;43(1):78-89. DOI: 10.1038/s41587-024-02367-0     [7] Didiot MC, et al. Exosome-mediated delivery of hydrophobically modified siRNA for Huntington's disease. Adv Sci. 2023;10(15):e2207523. DOI: 10.1002/advs.202207523 [8] Maring JA, et al. Cardiac progenitor cell exosomes improve cardiac function after myocardial infarction. Circulation. 2024;149(5):367-381. DOI: 10.1161/CIRCULATIONAHA.123.065871 [9] Théry C, et al. Minimal information for studies of extracellular vesicles 2018 (MISEV2018). J Extracell Vesicles. 2018;7(1):1535750. DOI: 10.1080/20013078.2018.1535750 | PMID: 30637094 [10] Lobb RJ, et al. Optimized exosome isolation protocol for cell culture supernatant and human plasma. J Extracell Vesicles. 2015;4:27031. DOI: 10.3402/jev.v4.27031 | PMID: 26194179 [11] Wiklander OPB, et al. Extracellular vesicle in vivo biodistribution is determined by cell source, route of administration and targeting. J Extracell Vesicles. 2015;4:26316. DOI: 10.3402/jev.v4.26316 | PMID: 25899407 [12] Kalluri R, LeBleu VS. The biology, function, and biomedical applications of exosomes. Science. 2020;367(6478):eaau6977. DOI: 10.1126/science.aau6977 | PMID: 32029601 本文为科普读物，不构成医疗建议。临床诊断和治疗请遵医嘱。

小核酸药物2026开年盛会，详细议程私聊188 0194 0589 前言 小核酸药物是由十几个到几十个核苷酸串联组成的短链核酸，通过干扰或调控基因表达实现疾病治疗目的。与传统的小分子化学药和抗体类药物相比，小核酸药物具有研发周期短、研发成功率高、候选靶点丰富、适应证分布广泛和治疗精准化等优点。 小核酸药物主要包括反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide，ASO)、小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)、微小RNA(microRNA，miRNA)、小激活RNA(small activating RNA，saRNA)、向导RNA(small-guide RNA，sgRNA)、适配体(aptamer)以及抗体核酸偶联药物(antibody-oligonucleotide conjugates，AOCs)、多肽核酸偶联药物(peptide-oligonu cleotide conjugates，POCs)等。 ASO是一类化学合成的单链寡核苷酸分子，通常由13~30个核苷酸组成，ASO通过沃森-克里克(Watson-Crick)碱基配对原则与靶标序列形成双链结构，从而影响靶基因的表达。 RNA干扰(RNA interference，RNAi)是将外源或内源RNA导入细胞后与靶基因的信使RNA(messenger RNA，mRNA)结合，从而阻断靶基因mRNA的翻译，进而抑制靶基因表达的一种技术。基于RNAi的小核酸药物有siRNA和miRNA，其中siRNA是一类长度为20~25个核苷酸的双链RNA分子，miRNA是内源性生成的单链RNA分子，长度通常为21~23个核苷酸。 saRNA是一种双链RNA分子，能够在转录水平上激活基因表达，而sgRNA则是单链RNA分子，在CRISPR/Cas9系统中起到导航作用，引导Cas9核酸酶到特定的基因位点进行编辑。适配体是一类具有特定三级结构的单链短核苷酸分子，与其他小核酸药物不同，适配体不通过碱基配对，而是类似于抗体，依靠其三维结构特异性结合配体。， AOCs和POCs将小核酸药物与抗体或多肽结合，提高小核酸药物的靶向性和递送效率。 自20世纪90年代初以来，小核酸药物领域经历了多次重大突破。1993年，Ambros和Ruvkun在秀丽隐杆线虫中首次发现miRNA，揭示了其在转录后基因调控中的重要作用。1998年，Mello和Fire进一步阐明了RNAi的机制，为小核酸药物的发展奠定了理论基础，并于2006年荣获诺贝尔生理学或医学奖。2023年，Karikó和Weissman因在核苷碱基修饰方面的贡献获得诺贝尔生理学或医学奖，其发现极大推动了mRNA疫苗和疗法的发展。2024年，诺贝尔生理学或医学奖再次授予Ambros和Ruvkun，以表彰其在miRNA发现及miRNA在转录后基因调控中的作用方面作出的开创性贡献。这些重要科学发现推动了小核酸药物的发展，国内外各大制药企业纷纷通过自主研发或合作引进管线等方式布局。本研究使用科睿唯安公司的药物早期研发情报数据库(Cortellis Drug Discovery Intelligence，CDDI)检索上市及临床在研的小核酸药物，分析其分类、研发国家及机构、靶点、适应证和递送系统等信息，总结小核酸药物研发现状，探索其未来发展方向。 数据来源 以科睿唯安公司CDDI数据库为检索来源，利用CDDI数据库检索“药物和生物制剂(Drugs&Bi ologics)”，在“药物分类(Product Category)”字段，限定“Antisense Therapy和Oligonucleotides，siRNA，mi croRNA，aptamer，saRNA，sgRNA，AOC，POC”，在“最高研发状态(Highest Phase)”字段，限定“Launched，Pre-Registered，PhaseⅢ，PhaseⅡ/Ⅲ，PhaseⅡ，PhaseⅠ/Ⅱ，PhaseⅠ”，共检索到17个已上市的小核酸药物和192个研发活跃(12~18个月内有进展的小核酸管线，去掉暂停/停止/未报告进展/非积极的项目)并处于临床研究阶段的小核酸药物，检索时间为2024年9月18日。 数据处理 数据处理阶段，对每种药物进行详细的临床试验匹配。利用CDDI数据库，针对研究范围内的192个小核酸药物，逐一访问其“临床试验(Clinical&Studies)”模块，并通过查阅和对比，实现了药物与相应临床试验的精确关联。 已上市药物情况 截至2024年9月18日，全球共有17款小核酸药物获批上市，见表1。1998年，首款ASO药物福米韦生获美国FDA批准上市，用于治疗获得性免疫缺陷综合征患者并发的由巨细胞病毒(cytomegalov irus，CMV)引起的视网膜炎。随着高效抗逆转录病毒治疗(highly active antiretroviral therapy，HAART)的发展，CMV感染病例显著减少，导致福米韦生的市场需求和销售额大幅下滑，该药于2002年在欧洲退市。 TTＲ: 转甲状腺素蛋白， transthyretin; SOD1: 超氧化物歧化酶1， superoxide dismutase 1; DMD: 抗肌萎缩蛋白基因; APOC3: 载脂蛋白C3， apolipoprotein C3; SMN2: 运动神经元存活基因2， survival of motor neuron 2; LDHA: 乳酸脱氢酶A， lactate dehydrogenase A; PCSK9: 前蛋白转化酶枯草溶菌素9， proprotein convertase subtilisin /kexin type 9; HAO1: 羟基酸氧化酶1， hydroxyacid oxidase 1; ALAS1: 5-氨基乙酰丙酸合酶1，5 -aminolevulinate synthase 1; LNP: 脂质纳米颗粒， lipid nanoparticle; PS: 硫代磷酸酯; 2＇-O-MOE: 2＇-O-甲氧基乙基; 2＇-O-Me: 2＇-O-甲氧基; 2＇-F: 2＇-氟; 5mC: 5-甲基胞苷; PMO: 磷酰二氨基吗啉代寡核苷酸， phosphorodiamidate morpholino oligomer 2006年，RNAi机制获得诺贝尔生理学或医学奖，极大推动了该领域的研究与开发。然而，RNAi的不稳定性、潜在的免疫原性及递送系统的缺乏导致研发进展缓慢，大型制药企业削减投资，行业发展陷入停滞。2014年，N-乙酰半乳糖胺偶联物(N-acetylgalactosamine conjugate，GalNAc)作为一种小核酸偶合递送系统飞速发展，促进了小核酸药物研发的迅速复苏。随着化学修饰和递送系统技术的进步，小核酸药物进入了稳健且快速发展的时代。2016年后多款重磅小核酸药物陆续上市，见图1。仅2023年全球共批准了4款小核酸药物，包括2款ASO药物、1款siRNA药物和1款适配体药物。全球17款获批小核酸药物中ASO药物数量最多(共10款)，其次为6款siRNA药物和1款适配体药物。国家药品监督管理局(National Medical Products Administration，NMPA)共批准了2款ASO药物和1款siRNA药物，分别是tofersen(2024年)、nusin-ersen(2019年)和inclisiran(2023年)。 图1 2016—2023 年全球获批的小核酸药物数量分布 遗传性疾病是目前获批最多的适应证类别，17种上市的小核酸药物中，有11种针对遗传性疾病(遗传性转甲状腺蛋白淀粉样变性、杜氏肌营养不良症、家族性乳糜微粒血症综合征、脊髓性肌萎缩、急性肝卟啉症)、1种用于眼科疾病(年龄相关性黄斑变性引起的地图样萎缩)、1种用于神经退行性疾病(肌萎缩侧索硬化症)、1种针对心血管疾病(高胆固醇血症)、1种用于血液肿瘤(骨髓增生异常综合征)、2种用于代谢疾病(1型原发性高草酸尿症)。2021年inclisiran作为饮食的辅助疗法获批，用于成人原发性高胆固醇血症或混合型血脂异常患者的治疗，该药适用于在接受最大耐受剂量的他汀类药物治疗仍无法达到低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C)目标水平的患者。 Inclisiran的获批标志着小核酸药物开始在慢性病管理中展现其独特的优势和潜力。 未经修饰的小核酸药物稳定性差且特异性低，容易引起脱靶毒性。化学修饰可以增强小核酸药物对核酸酶的抗性，减少免疫原性和脱靶效应，同时提高靶向性。常见的化学修饰涉及对磷酸骨架、核糖和碱基的修饰，包括PS，2'-O-Me，2'-O-MOE，2'-F和5mC。目前上市的11种ASO药物和6种siRNA药物均采用了骨架、核糖和碱基的化学修饰。PMO呈电中性，骨架中磷酸二酯键被磷酰二氨基键取代，核糖被吗啉环取代。PMO具有生物稳定性强、带中性电荷以及不依赖核糖核酸酶H(ribonuclease H，RNase H)的作用机制等优点。基于PMO修饰的4种ASO药物eteplirsen，golodirsen，viltolarsen，casimersen获批用于杜氏肌营养不良症的治疗。 核酸药物由于相对分子质量较大、容易降解和无法自由进入细胞等缺点，难以在体内发挥作用。递送系统可以保护核酸药物免于降解，确保其稳定性，并将其有效递送到靶组织。目前上市的小核酸药物采用了2种递送系统LNP和GalNAc，见图2。GalNAc是唾液酸受体(asialoglycoprotein receptor，ASGPR)的靶向配体，可以与肝脏实质细胞表面的ASGPR特异性结合，实现细胞的快速胞吞，该技术具有高度的肝靶向特异性。在6种使用递送系统的siRNA药物中，5种采用了GalNAc偶联递送系统、1种使用了LNP递送系统。eplontersen是首个获批上市的GalNAc偶联ASO药物，是Ionis公司继inotersen之后的第2种遗传性转甲状腺蛋白淀粉样变性治疗药物，相比inotersen，eplontersen的给药剂量更小、给药频率更低。 临床研究阶段的药物研发情况 截至2024年9月18日，全球共有192个研发活跃并处于临床研究阶段的小核酸药物，其中ASO药物86个，是临床研发数量最多的小核酸药物，约占45%; siRNA药物也是小核酸药物领域的研究热点之一，约占35%。此外，适配体、sgRNA、miRNA及saRNA的药物研发尚处于早期阶段，数量较少，见图3。 小核酸药物的研发在全球多个国家和地区均有分布，其中美国、欧洲和中国是主要的研发基地。美国在小核酸药物的研发方面处于领先地位，目前有109个小核酸药物处于临床研究状态，远超其他国家。在欧洲，英国、瑞士、荷兰和德国的小核酸药物临床研究较为活跃。我国有25个小核酸药物处于临床研究状态，其中siRNA和sgRNA研发管线布局较多，ASO药物研发参与较少，见表2。 全球范围内研发小核酸药物的企业中，Ionis公司和Alnylam公司布局最为广泛。Ionis公司专注于ASO药物研发，有32个临床在研的小核酸药物。Alnylam公司是RNAi领域的领军企业，有12个临床在研的小核酸药物。此外，Biogen公司、Arrow head公司、Lilly公司也较为活跃。我国小核酸药物发展呈现良好态势，多家企业积极布局小核酸药物的研发管线，瑞博生物公司、圣因生物公司、舶望制药公司和本导基因公司等企业都在积极推进多个项目的临床试验。 全球临床在研的小核酸药物仅有9%的药物最高研发状态为预注册和Ⅲ期临床试验，大多数集中在Ⅰ期和Ⅱ期临床试验阶段。处于Ⅲ期临床试验的药物中以ASO和siRNA药物为主，适配体、sgRNA、miRNA、saRNA药物大多处于早期临床研究阶段，见图4。 小核酸药物因其独特的机制和广泛的治疗潜力，能够针对多种疾病中的关键基因进行精准调控。与传统药物相比，小核酸药物能够作用于更广泛的靶点。目前，全球临床在研的小核酸药物中，针对HBV和DMD的靶点研究最为集中。此外，针对心血管疾病(如载脂蛋白和AGT)以及代谢性疾病[如PCSK9和patatin样磷脂酶结构域蛋白3(patatin-like phospholipase domain containing3，PNPLA3)]靶点也有多个药物正在进行临床研究，见表3。我国小核酸药物的靶点多集中于乙型肝炎和慢性病领域，较少涉及罕见病。 全球小核酸药物的适应证分布广泛，涉及遗传性疾病、肿瘤、神经系统疾病、代谢疾病、感染、心血管系统疾病等多个疾病领域，见图5。目前上市的小核酸药物大多集中在遗传性疾病领域，如杜氏肌营养不良症、脊髓性肌萎缩症和遗传性转甲状腺蛋白淀粉样变性。然而，临床在研的小核酸药物适应证已逐渐从早期的遗传病拓展到肿瘤、心血管疾病、代谢疾病等慢性病领域。在这一趋势中，我国制药企业大多将布局重心放在慢性病领域，如信达生物公司的高血压治疗药物SGB-3908、圣因生物公司的高血脂治疗药物SGB-9768、舶望制药公司的高血脂治疗药物BW-01、瑞博生物公司的高血脂治疗药物RBD-7022。此外，乙型肝炎也是我国制药企业布局较为集中的领域，包括浩博医药公司、瑞博生物公司、恒瑞医药公司、舶望制药公司、星曜坤泽公司和正大天晴公司在内的多家企业均有相关药物在研。 化学修饰和递送系统的进步推动了小核酸药物的发展和临床应用。目前已上市的ASO药物大多仅采用化学修饰，未使用特殊的递送系统。eplontersen是唯一获批上市的GalNAc-ASO偶联药物。多家制药公司如Ionis公司、CiVi Biopharma公司和Novartis公司正在积极开发GalNAc-ASO偶联药物。其中Ionis公司的临床进展最为迅速，已有2款产品进入预注册阶段、1款产品进入Ⅲ期临床试验，见表4。 GalNAc是目前小核酸药物应用最广泛的递送系统，但仅能靶向肝脏细胞。为了实现肝外递送目的，多项临床研究开发了新型递送系统，包括AOCs、POCs、外泌体和聚合物基质等，见表5。 AOCs将小核酸药物的靶点特异性与抗体的组织特异性相结合，协同发挥了这2种分子的优势。Avidity Biosciences公司和Dyne Therapeutics公司在AOCs研发领域表现突出，其中Avidity Biosciences公司的强直性肌营养不良药物AOC-1001已进入Ⅲ期临床试验阶段。 POCs将多肽与小核酸药物偶联，显著改善了小核酸药物的递送、细胞摄取和生物利用度。细胞穿透肽(cell-penetrating peptides，CPP)是一类能够有效穿过细胞膜的短肽序列，是POCs中研究最多的偶联物之一。进展较快的POCs已进入Ⅱ期临床试验阶段。Sarepta Therapeutics公司的vesleteplirsen是已获批上市的eteplirsen与CPP偶联而成，用于治疗杜氏肌营养不良症。PepGen公司基于其增强递送寡核苷酸(enhanced delivery oligonucleotide，EDO)技术平台设计的PGN-EDO51也是一种多肽-寡核苷酸偶联物，用于治疗杜氏肌营养不良症。外泌体是内源性的纳米级细胞外囊泡，具有免疫原性低、安全性高的特点。Codiak BioSciences公司研发的exoASO-STAT6已进入Ⅰ期临床试验，该药物能够选择性递送ASO以破坏肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages，TAM)中的STAT6信号传导并诱导抗肿瘤免疫反应。siG12D LODER是一种由可生物降解的聚合物基质包裹的针对KRAS G12D突变的siRNA，临床研究(NCT01676259)表明siG12D LODER联合化疗可延长KRAS G12D/V突变局部晚期胰腺癌患者总体生存期9.3个月。 总结 目前获批上市和处于临床研究状态的小核酸药物中，ASO药物因上市较早和成熟的商业化发展在小核酸药物研发中的占比较高，其次为siRNA药物。在靶点和适应证方面，上市的小核酸药物主要集中在罕见病领域，临床在研项目已开始向肿瘤、糖尿病、高血脂、乙型肝炎等领域拓展，但靶点已出现同质化现象，针对HBV、载脂蛋白、PCSK9的研究较为集中。临床分期方面，大多数小核酸药物仍处于早期研发阶段，而处于Ⅲ期临床试验的药物主要以ASO和siRNA药物为主。 欧洲和美国在小核酸药物研发领域仍处于领先地位，以Ionis公司和Alnylam公司为代表的大型制药企业在行业发展初期主要聚焦于致病机制明确、缺乏有效治疗手段的遗传性罕见病，通过快速验证潜在治疗靶点的有效性，借助孤儿药(orphan)、快速通道(fast track)、加速审批(accelerated approval)、优先审评(priority review)和突破性疗法(break- through therapy)等多条特殊认定和审评途径，实现了药物的快速获批和上市。在化学修饰和递送系统技术成熟后，逐步向心血管疾病及代谢疾病过渡。相比之下，我国对罕见病的研究相对较少，而更多集中在乙型肝炎和高血压、高血脂等慢性病领域，这可能与国内罕见病政策体系有待完善和罕见病药物研发成本较高有关。尽管我国在小核酸药物研发方面起步较晚，但在政策扶持和科研投资增加的推动下，国内多家企业正积极布局临床开发。 2024年瑞博生物公司和舶望制药公司先后完成了License-out授权，将企业的专利技术、药物候选物或研发平台授权给国际制药企业，展现了国内制药企业在全球小核酸药物研发领域中的活跃参与和贡献，再次证明了我国核酸药物发展的良好态势。未来随着国内小核酸药物研发能力的不断提升，有望逐步进入突破型创新阶段。 核酸药物具有其他药物所不具备的独特优势，但也面临诸多挑战。其在体内的稳定性较差、难以穿透细胞膜、靶向性不足，因而递送系统的开发一直是研发过程中需要解决的关键难题。目前，Gal-NAc-siRNA递送系统已较为成熟，已上市的6种siRNA药物中有5种采用了GalNAc系统。但上市的ASO药物大多数仅采用了结构修饰，虽然在一定程度上解决了直接递送的难题，但大剂量给药可能会限制其临床应用以及增加用药风险。首款Gal NAc-ASO药物eplontersen的获批以及多项GalNAc ASO药物临床试验的推进标志着ASO药物开始进入“GalNAc递送系统”时代。GalNAc递送系统具有高效的肝脏靶向性，在治疗肝脏疾病方面表现出显著优势，但要实现对肝外组织/细胞的靶向递送并达到更安全、更稳定和更高效的递送效果，仍然面临巨大挑战。目前多项临床试验对肝外递送系统进行了研究，包括开发AOCs、POCs、外泌体、聚合物基质等，但同时也面临提高递送效率、降低毒性和免疫原性、减少研发成本等问题。 小核酸药物作为一种新型治疗方式，在罕见病和慢性病治疗领域已展现出显著潜力。为了充分释放其治疗潜力，需要克服一系列挑战，探索新的治疗靶点和拓展适应证、避免靶点同质化对于推动小核酸药物的发展至关重要。同时需要来自物理、生物、化学和工程学等多学科的科研人员共同努力，推动肝外递送系统的发展，以解决当前递送技术的局限性。此外，加强产学研的深度合作、促进基础研究与临床应用的紧密结合、加快药物的临床转化是实现小核酸药物广泛应用的重要途径。 未来，小核酸药物有望成为具有更大应用潜力的治疗手段，进一步丰富治疗药物的选择，为患者的健康和福祉作出更大的贡献。 文章来源：迪易生命科学公众号。如有侵权，请联系删。 END 免责声明：本文仅作知识交流与分享及科普目的，不涉及商业宣传，不作为相关医疗指导或用药建议。文章如有侵权请联系删除。 小核酸药物2026开年盛会，详细议程私聊188 0194 0589 戳“阅读原文”立即领取小核酸药物论坛免费参会名额!